PT67細胞株復蘇失敗原因分析

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產品名稱：PT67細胞

中文名稱：小鼠逆轉錄病毒包裝細胞

種屬：小鼠

來源：逆轉錄病毒包裝細胞；雄性；NIH Swiss

培養條件：DMEM

生長狀態：貼壁

PT67細胞株復蘇失敗原因分析

其他細胞培養用液

在細胞培養過程中，除了培養基外，還經常用到一些平衡鹽溶液、消化液、pH調整液等。

一、平衡鹽溶液（balanced  salt  solution,BSS）：主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩定及提供簡單的營養。主要用于取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗、配制其他試劑等。zui簡單的BSS是Ringer。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有較高的NaHCO3(2.2g/L),適合于5%CO2  的培養條件，Hank's平衡液僅含有0.35g/L  NaHCO3，不能用于5%CO2的環境，若放入CO2培養相，溶液將迅速變酸，使用時應注意。

配制溶液應使用雙蒸水或去離子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，應當首先溶解這些成分。配好的平衡鹽溶液可以過濾除菌或高溫滅菌。

PT67細胞株復蘇失敗原因分析

PT67    人胚胎橫紋肌瘤細胞    人    胚胎性橫紋肌肉瘤；女性    DMEM    貼壁

PT67    人Burkkit淋巴瘤細胞    人    Burkkit淋巴瘤    1640    懸浮

PT67    小鼠調節T細胞    小鼠    調節T細胞    1640    懸浮

PT67    小鼠逆轉錄病毒包裝細胞    小鼠    逆轉錄病毒包裝細胞；雄性；NIH    Swiss    DMEM    貼壁

OCI-AML4    人急性髓系白血病細胞    人    急性髓系白血病；女性    IMDM    懸浮

OCI-LY18    人彌漫大B細胞淋巴瘤細胞    人    彌漫大B細胞淋巴瘤；男性    1640    懸浮

HRMC    人腎系膜細胞    人    腎；系膜細胞    DMEM    貼壁

hREC    人視網膜內皮細胞    人    視網膜；內皮細胞    DMEM    貼壁

HOCF    人脈絡膜成纖維細胞    人    脈絡膜；成纖維細胞    DMDM    貼壁

QBI-293A    腺病毒包裝人胚腎細胞    人    胚腎；腺病毒包裝    DMDM    貼壁

OVHM    小鼠卵巢癌細胞    小鼠    卵巢癌    1640    貼壁

WEHI-3B    小鼠髓樣單核白血病細胞    小鼠    白血??；BALB/c    1640    懸浮

SGC7901    人低分化胃癌細胞    人    胃癌；女性    1640    貼壁

HSC-2    人口底癌細胞    人    口腔鱗癌；男性    DMEM    貼壁

HRCEC    人視網膜微血管內皮細胞    人    視網膜微血管；內皮細胞    DMEM    貼壁

RBMVEC    大鼠腦微血管內皮細胞    人    腦微血管；內皮細胞    1640    貼壁

TE-13    人食管癌細胞    人    食管鱗癌；男性    DMEM    貼壁

HPAC    人胰腺癌細胞    人    胰腺癌；女性    1640    貼壁

HS766T    人胰腺癌細胞    人    胰腺癌；淋巴結轉移；男性    1640    貼壁

HVSMC    人血管平滑肌細胞    人    血管平滑肌    DMEM    貼壁

BT20    人乳腺癌細胞    人    乳腺導管癌；女性    EMEM/1640    貼壁

A101D    人黑色素瘤細胞    人    黑色素瘤；男性    DMEM    貼壁

SF126    人膠質母細胞瘤細胞    人    膠質母細胞瘤；女性    DMEM    貼壁

CAL62    人甲狀腺癌細胞    人    未分化甲狀腺癌；女性    DMEM    貼壁

UMUC3    人膀胱癌細胞    人    膀胱癌；男性    1640    貼壁

A673    人橫紋肌瘤細胞    人    尤因肉瘤；女性    DMEM    貼壁

C518    大鼠膝關節退變軟骨細胞    大鼠    膝關節退變軟骨細胞    EMEM    貼壁

RS1    大鼠皮膚成纖維樣細胞    大鼠    皮膚；成纖維樣細胞    DMEM    貼壁

Bcap-37    人乳腺癌細胞    人    乳腺癌；女性    1640    貼壁

SPC-A-1    人肺腺癌細胞    人    肺腺癌    1640    貼壁

RAEC    大鼠主動脈血管內皮細胞    大鼠    主動脈；血管內皮細胞    1640    貼壁

SF767    人腦瘤細胞    人    腦瘤；女性    DMEM    貼壁

RSC-364    大鼠滑膜細胞    大鼠    滑膜細胞    DMEM    貼壁

CRFK    貓腎細胞    貓    腎；自發永生；女性    1640    貼壁

NB-4    人急性早幼粒白血病細胞    人    急性早幼粒細胞白血??；女性    1640    懸浮

ME-1    人類急性髓系白血病細胞    人    急性髓系白血病；男性    IMDM    懸浮

MKN45    人低分化胃癌細胞    人    胃癌；肝轉移；女性    1640    貼壁

CESS    人急性髓系白血病細胞    人    急性髓系白血??；男性    IMDM    懸浮

J-111    人單核細胞白血病細胞    人    單核細胞白血病    1640    懸浮

OCI-AML2    人急性髓系白血病細胞    人    急性髓系白血病；男性    IMDM    懸浮

NKM-1    人白血病細胞    人    急性髓系白血??；男性    1640    懸浮

NCI-H23    人非小細胞肺癌細胞    人    肺腺癌；男性    1640    貼壁

ROS17/2.8    大鼠成骨細胞    大鼠    骨肉瘤；ACI    9935    DMEM/F12    貼壁

GL261    小鼠膠質瘤細胞    小鼠    膠質瘤；C57BL/6    DMEM    貼壁

RCS    大鼠軟骨肉瘤細胞    大鼠    軟骨肉瘤；SD    EMEM    貼壁

RL    人彌漫大B淋巴瘤細胞    人    彌漫大B淋巴瘤；男性    1640    懸浮

DCS    人樹突狀細胞    人    樹突狀細胞    DMEM    貼壁消化液：取材進行原代培養時常常需要將組織塊消化解離形成細胞懸液，傳代培養時也需要將貼壁細胞從瓶壁上消化下來，常用的消化液有胰酶（Trypsin）溶液和EDTA溶液，有時也用膠原酶（collagenase）溶液。

1、胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常見有1：125和1：250，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。組織培養用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%濃度，配制時要用不含Ca2+    、Mg2+及血清的平衡鹽溶液（如前面的D-Hank's），因為這些物質會對胰酶產生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH是8-9，配制胰酶溶液應將液體調至pH8左右，充分溶解，過濾除菌。過濾后可以再調只pH7.5，也可不調。

使用細胞清洗液配制胰酶消化液：含0.5%胰酶的細胞清洗液（100ml細胞清洗液加0.5g胰酶），過濾除菌，分裝于4度保存。

2、EDTA溶液：EDTA溶液也常用來解離細胞，它的作用機制是破壞細胞間的連接。對于一些貼壁特別牢固的細胞，還可以用EDTA和胰酶的混合液進行消化。EDTA溶液的使用濃度為0.02%，配制時應加堿助溶，配制后可過濾除菌，也可高溫消毒滅菌。

3、膠原酶溶液：膠原酶在上皮類細胞原代培養時經常使用，膠原酶作用的對象是膠原組織，因此不容易對細胞產生損傷。膠原酶的使用濃度為0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的*pH為6.5。膠原酶不受Ca2+ 、Mg2+及血清的抑制，配制時可用PBS。

PT67細胞株復蘇失敗原因分析