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T4 DNA Ligase 是從表達T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經誘導表達后分離純化而來的。它催化相鄰DNA鏈的的5’-磷酸基團和3’羥基基團以磷酸二酯鍵結合反應。該酶催化平末端或粘性末端DNA的連接，修復雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口，但是對于單鏈核苷酸，沒有活性。

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